2. 核酸檢測

主要指聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，即通常所說的PCR檢測，優(yōu)勢在于其他方法學(xué)難以企及的靈敏度，同時(shí)特異性強(qiáng)、擴(kuò)增環(huán)節(jié)自動(dòng)化程度高，窗口期較短，一般3-5天（理論上核酸只要感染粘膜，就可以檢測到），相對封閉的操作環(huán)境可以降低樣本對環(huán)境的污染。

但其劣勢在于對實(shí)驗(yàn)室硬件設(shè)備以及人員都有較高的特殊要求；整體檢測時(shí)間較長，一輪檢測常需要2-3小時(shí)以上；多數(shù)PCR儀通量受限于96孔，算上內(nèi)標(biāo)的使用，實(shí)際患者樣本檢測量更少。同時(shí)，PCR問題是極易污染，其微量的污染即可引發(fā)假陽性的產(chǎn)生。

疫情爆發(fā)以來，有不完全統(tǒng)計(jì)資料提示“核酸檢測對于陽性病人，高有百分之30~50的陽性率。也就是說，部分患者核酸檢測結(jié)果為陰性，但在臨床上被確認(rèn)為疑似新冠肺炎，屬于假陰性。甚至有報(bào)道稱個(gè)別患者7次核酸檢測均為陰性，直到第8次才檢出陽性結(jié)果，因此部分臨床醫(yī)生和民眾開始質(zhì)疑這項(xiàng)檢測無法發(fā)揮作用。關(guān)于這個(gè)問題我們也分析了其原因：

1、2019-nCoV病毒特點(diǎn)：行業(yè)關(guān)于新冠病毒的認(rèn)知還在逐步增長中，患者感染病毒后，體液中病毒的含量、分布與癥狀嚴(yán)重程度是否呈線性正相關(guān)尚不明確。如果有臨床癥狀，但病毒在肺部尚未快速復(fù)制釋放，此時(shí)采樣，就有可能因采集的病毒量不足無法確診。尤其在發(fā)病早期可能沒有咳嗽，上呼吸道、包括鼻咽部的病毒量很少，檢測結(jié)果很可能為陰性。但這樣患者通常傳染性也小，因?yàn)樯虾粑罌]有檢測到，提示其傳染性不強(qiáng)。

2、檢測前階段影響：出于可操作性的限制，目前比較常見的采樣方法是使用鼻咽拭子、痰液或肺泡灌洗液采集，其中常用的是鼻咽拭子。鼻咽拭子采集有先天的局限性，隨機(jī)性較強(qiáng)；其次試劑盒要求病毒滅活，而新冠作為RNA病毒，穩(wěn)定性較低。而采樣后的核酸提取效率一定程度上會(huì)受個(gè)體差異、采樣操作及實(shí)驗(yàn)操作規(guī)范程度等影響。

在臨床檢測中，采樣→送檢→滅活→提取→檢測，其中任一環(huán)節(jié)出現(xiàn)問題，都有可能導(dǎo)致無法提取出足量、有效的病毒核酸，導(dǎo)致后續(xù)檢測出現(xiàn)假陰性結(jié)果。建議有條件的醫(yī)療機(jī)構(gòu)，選擇以深部痰液樣本為佳，重癥氣管插管病人以肺泡灌洗液為準(zhǔn)。

3、檢測結(jié)果解讀：有些試劑說明書上描述需2個(gè)靶點(diǎn)同時(shí)陽性才可報(bào)陽性，而新冠作為RNA病毒并不穩(wěn)定，易發(fā)生變異，將只有1個(gè)靶點(diǎn)陽性的結(jié)果報(bào)為陰性是否也是導(dǎo)致假陰性的原因之一，值得進(jìn)一步研究。另外，部分結(jié)果正確判斷需要有經(jīng)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)人員對反應(yīng)曲線進(jìn)行調(diào)整。