核酸提取試劑盒

（磁珠法）

貨號：DP301                  規(guī)格：100T                    保存：室溫

產(chǎn)品說明：

試劑盒采用具有獨特分離作用的磁珠和緩沖液系統(tǒng)，可從血液、血清、拭子保存液、組織勻漿液等樣本中分離純化核酸。本試劑盒中所使用的磁珠為特殊包被的磁珠，在一定條件下對核酸具有很強的親和力，而當條件改變時，磁珠釋放所吸附的核酸，能夠達到快速分離純化核酸等目的。所提取的核酸純度高可直接用于PCR、Real-time PCR和Southern Blot等實驗。

產(chǎn)品組成：

自備儀器、耗材和試劑：渦旋混勻儀、水浴鍋、80%乙醇、2.0mL離心管、磁力架。

儲存條件：

該試劑盒置于室溫（15-25℃）干燥條件下，可保存12個月。長期保存時需置于2-8℃。

產(chǎn)品特點：

1. 樣本使用廣泛：可從血液、血清、拭子保存液、組織勻漿液等樣品中直接提取核酸。

2. 高質(zhì)量：獨特的裂解緩沖體系，純化出的核酸可滿足高通量測序等實驗要求。

3. 快速無毒：采用磁珠吸附，無需使用酚、氯仿，可結(jié)合自動化儀器使用，30min內(nèi)即可完成實驗。

操作步驟：

1. 樣品制備（前處理）：

血液、血清等液體樣本可直接進行核酸提取。

組織樣本：稱取50-200mg組織放于2mL無酶離心管中，加入0.3-0.8mL生理鹽水或PBS緩沖液和2-4粒鋼珠，于研磨儀中進行低溫研磨0.5-2min，至無塊狀物存在，然后8000rpm離心1min，取上清液進行核酸抽提。

分泌物樣本：使用棉拭子在生理鹽水中浸潤后在采樣部位翻轉(zhuǎn)涂抹，完成采集后將拭子頭掰下放入含1mL生理鹽水的離心管中渦旋30s，取200μL混勻液進入后續(xù)步驟。

2. 取1.5mL離心管，向離心管中加入200μL樣本和500μL裂解液和20μL磁珠，渦旋混勻后65℃水浴15min。

3. 水浴結(jié)束后瞬時離心，將管蓋及側(cè)壁液體甩至管內(nèi)溶液中。

4. 將離心管置于磁力架上，反復(fù)顛倒磁力架，將可能留存在管蓋部分的磁珠沖刷至管內(nèi)溶液中，靜置磁力架磁吸1-2min至溶液澄清，棄去管蓋和管內(nèi)上清液，注意不要觸碰磁珠。

5. 向離心管中加入700μL洗滌液，點震混勻1min，將離心管置于磁力架上，反復(fù)顛倒磁力架，將可能留存在管蓋部分的磁珠沖刷至管內(nèi)溶液中，靜置磁力架磁吸1min或至溶液澄清，棄去管蓋和管內(nèi)上清液，注意不要觸碰磁珠。

6. 向離心管中加入700μL 80%乙醇（自備），按照步驟4的方法洗滌2次。

7. 將離心管置于磁力架上，室溫開蓋干燥15-30min至無醇類液體殘留。

注：因?qū)嶒灜h(huán)境不盡相同，干燥過程中注意觀察磁珠狀態(tài)。如磁珠仍可流動或表面發(fā)亮，表明未干燥充分；如磁珠表面無光澤，表明已干燥充分；如磁珠表面干裂，表明過分干燥，過分干燥會降低DNA洗脫效率，應(yīng)避免磁珠過分干燥。

8. 向離心管中加入50-100μL洗脫液，吹打混勻，于55℃水浴洗脫5min。

9. 洗脫結(jié)束后混勻磁珠，將離心管置于磁力架上磁吸1min或至溶液澄清，小心吸取上清，進行下游實驗或于-20℃保存待用。

注意事項（在使用本試劑盒前請閱讀此注意事項）：

1. 樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融，否則會導(dǎo)致核酸提取量下降。

2. 若裂解液中有沉淀或渾濁，可在37-60℃水浴中溶解，搖勻后使用。

3. 磁珠在使用前需在旋渦振蕩器上充分混勻。如使用工作站提取，磁珠吸取需在振蕩器上進行，或每次吸取前進行吹打。且一次吸取的磁珠必須一次放掉，不可對一次吸取的磁珠進行分液。

4. 本試劑盒樣本處理過程環(huán)境溫度要求不低于24℃。

5. 不同批號的試劑若無特殊說明，請勿混合使用，并保證在有效期內(nèi)使用該試劑盒。

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