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總DNA/RNA提取試劑盒
(柱提法)
貨號:DP201 規(guī)格:25T/50T 保存:室溫
產(chǎn)品原理:
總DNA/RNA提取試劑盒基于硅膠柱純化方式。樣品在裂解液的作用下裂解,將核酸釋放到裂解液中。核酸在高鹽的環(huán)境下通過硅膠柱時(shí)將被吸附在硅膠柱的膜上,而蛋白質(zhì)則不被吸附而去除。吸附了核酸的濾膜經(jīng)洗滌去除殘留的蛋白質(zhì)和鹽,最后可以用DEPC處理水洗脫濾膜上吸附的核酸,得到的核酸純度高,可直接用于各種下游實(shí)驗(yàn)。
產(chǎn)品說明:
總DNA/RNA提取試劑盒適合于快速從組織、血液、分泌物、排泄物等樣品中提取高純度的包含病毒、細(xì)菌及寄生蟲等生物的總核酸。試劑盒基于硅膠柱純化技術(shù),提取過程中無需使用有毒的酚氯仿抽提,也無需進(jìn)行耗時(shí)的醇類沉淀,獲得的核酸可直接用于PCR/RT-PCR、Sorthern雜交/Northern雜交、以及LAMP/RT-LAMP等系列下游實(shí)驗(yàn)。
產(chǎn)品組成:
注意:洗滌液在初次使用前加入無水乙醇(25T加入20mL,50T加入40mL),于室溫保存。
儲存條件:
該試劑盒置于室溫(15-25℃)干燥條件下,可保存12個月。長期保存時(shí)需置于2-8℃。
操作步驟:
1. 樣品制備(前處理):
血液樣品:?。?/span>500μL EDTA抗凝血離心30s,取200μL上清液進(jìn)入后續(xù)步驟。
組織樣品:取0.05-1g的組織樣品,加入5-10倍生理鹽水研磨至勻漿,取200μL勻漿液進(jìn)入后續(xù)步驟。
分泌物、糞便樣品:使用棉拭子在生理鹽水中浸潤后在采樣部位翻轉(zhuǎn)涂抹,完成采集后將拭子頭掰下放入含1mL生理鹽水的離心管中渦旋30s,取200μL混勻液進(jìn)入后續(xù)步驟。
2. 取步驟1中制備的200μL樣品至1.5mL離心管中,加入500μL裂解液,顛倒混勻,靜置5min裂解,10000rpm離心3min。
3. 取400uL上清液至新的1.5mL離心管中,加入200μL無水乙醇,渦旋混勻20s。
4. 把管A裝在2mL管B中,將步驟3中的混勻液全部轉(zhuǎn)移至A管中,10000rpm離心1min。
5. 倒棄管B中的濾液,把管A裝回管B中,加入600μL洗滌液至管A中,10000rpm離心1min。
6. 倒棄管B中的濾液,把管A裝回管B中,10000rpm離心2min。
7. 把管A裝在新的1.5mL離心管中。加入50μL洗脫液至管A中,靜置1-2min,10000rpm離心1min,所得溶液即為樣品總核酸溶液。若暫時(shí)不用,于-80℃儲存。
注意事項(xiàng)(在使用本試劑盒前請閱讀此注意事項(xiàng)):
1. 為確保檢測結(jié)果準(zhǔn)確,請嚴(yán)格按照說明書操作。
2. 試劑盒內(nèi)管A與管B為一次性用品,請勿重復(fù)使用。
3. 所有用于檢測的廢棄物品均應(yīng)放入含消毒液的廢物缸內(nèi),浸泡消毒;實(shí)驗(yàn)結(jié)束后立即用1%次氯酸鈉或75%酒精消毒工作臺。
4. 實(shí)驗(yàn)過程中實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)佩戴手套、口罩,穿著實(shí)驗(yàn)服,避免試劑、樣品與人體接觸實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)盡量避免接觸A管和離心管的管口,在進(jìn)行操作步驟1-4時(shí)若有樣品溶液粘在手套上或?yàn)R出,應(yīng)立即更換手套并清潔濺出液;所有接觸病料的物品均應(yīng)合理處置。
地點(diǎn):石家莊高新區(qū)太行南大街509號國械堂高端醫(yī)療器械產(chǎn)業(yè)園A-5棟702室
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