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產(chǎn)品介紹
本品提供了所有的用于cDNA第一鏈合成的試劑,其中逆轉(zhuǎn)錄酶的RNase H活性較低,在50℃下具有更高的熱穩(wěn)定性和更長的半衰期,可提供較其他逆轉(zhuǎn)錄酶更高的全長cDNA產(chǎn)量,能夠利用起始RNA穩(wěn)定地生成具有完整基因代表性的cDNA,優(yōu)化后的體系顯著提高反應(yīng)的靈敏性,避免假陰性結(jié)果。本品可獲得代表起始RNA的高保真度的cDNA,適用于靈敏度要求較高的實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR和芯片實(shí)驗(yàn)。本品中HI-MMLV Reverse Transcriptase的濃度為200U/μL。
產(chǎn)品規(guī)格
試劑組成 | ER001-01 (25T) | ER001-02 (50T) | ER001-03 (100T) | 保存溫度 |
HI-MMLV Reverse Transcriptase(200U/μl) | 25μl | 50μl | 100μl | -20℃ |
5x HI-MMLV Buffer (Mg2+ plus) | 125μl | 250μl | 500μl | |
10x HI-MMLV Solution I | 60μl | 120μl | 240μl | |
RNase Inhibitor (40U/μl) | 25μl | 50μl | 100μl | |
RNase-Free ddH?O | 1ml | 1ml | 1ml*2 | |
Oligo (dT)16 (10μM) | 60μl | 120μl | 240μl | |
Random Primer (10 μM) | 60μl | 120μl | 240μl | |
dNTP Mixture (25mM each) | 12μl | 25μl | 50μl |
產(chǎn)品用途
First-Strand cDNA的合成;
cDNA Probe的制備;
一步法RT-PCR反應(yīng);
Real Time PCR反應(yīng)和芯片實(shí)驗(yàn)。
產(chǎn)品特點(diǎn)
酶活高效:高效的逆轉(zhuǎn)錄酶活性,后續(xù)實(shí)驗(yàn)兼容性好。
應(yīng)用廣泛:適用于所有RNA,尤其是具有復(fù)雜二級(jí)結(jié)構(gòu)的RNA模板。
穩(wěn)定性強(qiáng):較高的熱穩(wěn)定性及靈敏度、更長的半衰期。
簡便快捷:配置內(nèi)容齊全,操作簡便,可獲得高品質(zhì)cDNA。
實(shí)驗(yàn)示例
使用ER001和國內(nèi)某品牌的逆轉(zhuǎn)錄酶逆轉(zhuǎn)錄得到的核酸進(jìn)行檢測,檢測結(jié)果如下:
批次A | 批次B | |
ER001 | 1146.5ng | 1146.35ng |
國內(nèi)A廠家 | 1108.45ng | 1160.6ng |
對(duì)逆轉(zhuǎn)錄出來的核酸進(jìn)行熒光定量檢測結(jié)果如下圖:
使用HI-MMLV Reverse Transcriptase Kit ( ER001),對(duì)逆轉(zhuǎn)錄出來的
片段進(jìn)行擴(kuò)增,擴(kuò)增效果比國內(nèi)A公司同類產(chǎn)品CT小。左側(cè)為ER001,
右側(cè)為國內(nèi)A廠家。
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