4. 抗凝劑
血液和骨髓穿刺(BMA)標(biāo)本采集應(yīng)使用合適的抗凝管或含其他添加劑的試管。試管添加劑的選擇應(yīng)根據(jù)分析物類型、試驗(yàn)、標(biāo)本量而定,有研究表明肝素和亞鐵血紅素可能會抑
制PCR反應(yīng)。因此,推薦使用EDTA和ACD抗凝劑檢測血漿或骨髓穿刺標(biāo)本。如果被測量為細(xì)胞內(nèi)RNA,采集血液或骨髓的設(shè)備應(yīng)包含RNA穩(wěn)定劑,或者在采集后立即加入RNA穩(wěn)定溶液。
5. 組織標(biāo)本
如果無法獲得血液或口腔黏膜細(xì)胞(如患者死亡),或者組織標(biāo)本的基因型同血液或口腔黏膜細(xì)胞不同,或者組織為某些潛在感染物質(zhì)核酸的來源時(shí),可采用組織標(biāo)本。通常佳的組織量為1-2g,但由于各種組織所含的DNA和RNA的量不同,采集組織的量也因組織而異。多細(xì)胞組織如骨髓、淋巴結(jié)、脾適用于基因組DNA檢測,需要的組織量較少。少細(xì)胞標(biāo)本如肌肉、纖維、脂肪組織不是基因組DNA的佳來源,采集量大于1-2g。通常,如果沒有廣泛脂肪浸潤,大于10mg的組織至少獲得10μg的RNA或DNA。不同組織的蛋白質(zhì)的量和類型各不相同,核酸分離方法也因組織而異。按照特定來源的組織,根據(jù)廠家建議分離DNA或RNA。
病理科醫(yī)生通常從大塊組織中采取有代表性的部分組織進(jìn)行固定、染色、顯微鏡檢測和病理診斷,或者選擇有代表性的組織提取DNA或RNA進(jìn)行分子學(xué)分析。一般選擇病灶組織進(jìn)行檢測、非病灶組織作為對照。對照組織對某些分子檢測是至關(guān)重要的,如雜合性缺失分析或微衛(wèi)星不穩(wěn)定性試驗(yàn)。
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