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Taq酶的簡單介紹

2022-04-03 09:37:31

熱啟動Taq酶是從水生棲熱菌 Thermus Aquaticus ( Taq )中分離出的具有熱穩(wěn)定性的DNA聚合酶。一般常用的Taq酶可以分為rTaq酶和LTaq酶兩類,LTaq酶的保真性更強,耐熱性也比rTaq酶好。

對于PCR的應用有里程碑的意義,PCR循環(huán)包括變性(90 °C左右)、退火(50°C左右)、延伸(70°C左右),每一步對溫度的要求都不一樣,多數(shù)酶在高溫時即變性失活,然而該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,所以不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷。同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應用,并逐步應用于臨床。

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在應用Taq DNA聚合酶進行PCR反應時,變性往往在94~95°C條件下進行,這也是Taq DNA 聚合酶進行30個或者30個以上PCR循環(huán)而活力不受到過多損失時所能耐受的高溫度。然而這種酶的保真度不高,因為這種酶的DNA聚合作用依賴于3'-5'校正。

與一般酶不同,用Taq酶擴增DNA時常使片段3'端凸出一個A,應注意.這是因為TaqDNA聚合酶具有一種非模板依賴的末端轉(zhuǎn)移酶活性(延伸活性),導致擴增DNA片段在3'末端附加單個的未配對的核苷酸。

熱啟動Taq酶


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