質(zhì)粒提取試劑盒與核酸提取試劑盒是否一樣?有什么區(qū)別?我們通過分析給出一個答案

　　1.wash buffer中加入無水乙醇后,終濃度差不多就是70%的乙醇溶液了,在沉淀的DNA中,由于過多的鹽雜質(zhì)存在,影響DNA的酶切等反應,wash buffer就是洗去這些鹽雜質(zhì)的.

　　2.用無水乙醇沉淀DNA,這是實驗中常用的沉淀DNA的方法.乙醇的優(yōu)點是可以任意比和水相混溶,乙醇與核酸不會起任何化學反應,對DNA很安全,因此是理想的沉淀劑.DNA溶液是DNA以水合狀態(tài)穩(wěn)定存在,當加入乙醇時,乙醇會奪去DNA周圍的水分子,使DNA失水而易于聚合.一般實驗中,是加2倍體積的無水乙醇與DNA相混合,其乙醇的最終含量占67%左右.因而也可改用95%乙醇來替代無水乙醇(因為無水乙醇的價格遠遠比95%乙醇昂貴).但是加95%的乙醇使總體積增大,而DNA在溶液中有一定程度的溶解,因而DNA損失也增大,尤其用多次乙醇沉淀時,就會影響收得率.折中的做法是初次沉淀DNA時可用95%乙醇代替無水乙酵,最后的沉淀步驟要使用無水乙醇.也可以用0.6倍體積的異丙醇選擇性沉淀DNA.一般在室溫下放置15-30分鐘即可.如果你沒有加無水乙醇,核酸不能沉淀,都隨洗液棄掉了.

　　3.十二烷基硫酸鈉(sodium dodecylsulfate)遇到鉀離子后變成了十二烷基硫酸鉀(potassium dodecylsulfate, PDS),鉀離子置換了SDS中的鈉離子形成了不溶性的PDS,而高濃度 的鹽,使得沉淀更完全.大家知道SDS專門喜歡和蛋白質(zhì)結合,平均兩個氨基酸上結合一個SDS分子,鉀鈉離子置換所產(chǎn)生的大量沉淀自然就將絕大部分蛋白質(zhì) 沉淀了,讓人高興的是大腸桿菌的基因組DNA也一起被共沉淀了.這個過程不難想象,因為基因組DNA太長了,長長的DNA自然容易被PDS給共沉淀了,盡管SDS并不與DNA分子結合. 需要特別說明的是：醋酸的加入是為了中和NaOH,因為長時間的堿性條件會打斷DNA,所以要中和之.基因組DNA一旦發(fā)生斷裂,只要是50-100 kb大小的片斷,就沒有辦法再被PDS共沉淀了.所以堿處理的時間要短,而且不得激烈振蕩,不然最后得到的質(zhì)粒上總會有大量的基因組DNA混入.

　　河北三獅生物科技有限公司成立于2018年，是一家專注于核酸診斷原材料和分子工具酶等開發(fā)與生產(chǎn)的高新技術生物企業(yè)，致力于為生命科學與生物醫(yī)藥領域提供高品質(zhì)的產(chǎn)品與服務。目前產(chǎn)品涵蓋生命科學研究相關基礎生物學試劑，以及食品安全、動物疫病、精準醫(yī)療等領域相關核心酶類制劑產(chǎn)品、分子診斷檢測類試劑盒。三獅生物在順應行業(yè)時代發(fā)展趨勢下持續(xù)創(chuàng)新，為合作伙伴創(chuàng)造價值，為樹立民族品牌不懈努力。