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實(shí)驗(yàn)室被核酸污染怎么辦?

2022-01-05 16:45:05

避免污染的前提,我們需要先了解污染來源都有哪些?

1、樣本間交叉污染:收集樣本的容器被污染或樣本密封不嚴(yán)導(dǎo)致外溢;不同樣本移液時忘記更換槍尖或未使用帶濾芯槍尖;移液器等實(shí)驗(yàn)器具及耗材未及時消毒滅菌;不同樣本同時開蓋或樣本劇烈震蕩、反復(fù)吹吸導(dǎo)致氣溶膠形成擴(kuò)散,相互交叉污染。


2、實(shí)驗(yàn)試劑污染:主要是在 PCR 組分試劑加樣過程中,由于移液器、容器、陰性對照及其它試劑被核酸模板或陽性對照污染。加樣過程中,因?yàn)镻CR試劑對溫度十分敏感,需要通過冰浴使得PCR試劑和PCR板/管處于0℃,但這個過程也充滿污染風(fēng)險(xiǎn)。


3、擴(kuò)增產(chǎn)物污染:大量拷貝的產(chǎn)物泄漏或擴(kuò)增后的PCR反應(yīng)管意外開蓋,這是PCR反應(yīng)中主要、常見的污染問題。因?yàn)镻CR產(chǎn)物拷貝量大,遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于PCR檢測數(shù)個拷貝的極限,所以極微量的PCR產(chǎn)物污染,就可形成假陽性。


4、克隆質(zhì)粒污染:作為陽性質(zhì)控品的克隆質(zhì)粒外溢。

我們可以通過以下措施降低污染機(jī)會:

1、正確佩戴手套:手套未緊密貼合拇指、食指和中指,在進(jìn)行開蓋操作時容易發(fā)生交叉污染。


2、正確使用生物安 全柜:簡單、整潔、避免通風(fēng)口堵塞;操作前后紫外線照射,消毒劑隨手可及;廢液缸里有1/3體積的含氯消毒液,并且及時清理廢液缸,保證廢物不超過廢液缸體積的2/3。


3、重視通風(fēng):不定期對房間進(jìn)行通風(fēng),每次至少持續(xù)30min。


4、PCR擴(kuò)增區(qū)去污染:PCR反應(yīng)管蓋緊,避免擴(kuò)增后的核酸對環(huán)境的污染。


5、核酸提取儀去污染:每天多批次檢測時,在每一批次檢測完以后用百分之75的乙醇和核酸去除劑對儀器進(jìn)行去污染。


6、實(shí)驗(yàn)室隨手可及的消毒劑。

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