熱啟動(dòng)Taq酶 傳統(tǒng)的Taq DNA聚合酶抗體可以有效抑制Taq酶的聚合酶活性，從而避免錯(cuò)配或引物二聚體引起的非特異性擴(kuò)增。

然而Taq酶除了具有5'→3'聚合酶活性，還有5'→3'核酸外切酶活性，這部分外切酶活性可能會(huì)在低溫時(shí)導(dǎo)致錯(cuò)配探針或其它物料降解，造成非特異信號(hào)。開發(fā)的熱啟動(dòng)Taq酶雙封閉抗體不僅可以封閉Taq酶的有5'→3'聚合酶活性，還能同時(shí)封閉Taq酶的5'→3'外切酶活性，雙管齊下，既能有效防止錯(cuò)配或引物二聚體引起的非特異性擴(kuò)增，又能防止物料降解產(chǎn)生非特異信號(hào)，雙重提升試劑的穩(wěn)定性。

Taq酶雙封閉抗體不僅可封閉野生型Taq酶，對(duì)于多種突變體Taq酶亦可適用，封閉之后的熱啟動(dòng)Taq酶可以正常保存至-20℃。

1 μL抗體（5 mg/mL）可封閉20-50 U Taq DNA聚合酶：

?  小樣室溫（25℃）旋轉(zhuǎn)混勻孵育30 min

?  大樣室溫（25℃）旋轉(zhuǎn)混勻孵育2~3 h

用傳統(tǒng)封閉抗體與雙封閉抗體分別封閉Taq DNA聚合酶，配置成含引物探針的全預(yù)混液，在4℃放置10天或在37℃放置1、3、5天，擴(kuò)增10000拷貝ASFV質(zhì)粒，觀察擴(kuò)增曲線和Ct值變化，對(duì)比傳統(tǒng)封閉抗體和雙封閉抗體對(duì)全預(yù)混反應(yīng)液穩(wěn)定性的作用。